聚焦真人电影男主Larry Daley的儿子Nick Daley，他不情不愿地也成为了一名博物馆管理员，而《博物馆奇妙夜2》里的卡门拉法老又回来了，想要征服世界。

少根筋的单亲妈咪珊蒂（詹妮弗·安妮斯顿 饰），独力抚养两个儿子，总期盼着与前夫破镜重圆，没想到他却娶了一个20岁的小萝莉；单亲奶爸布莱德利（杰森苏戴西斯 饰），身兼父母两职辛苦拉拔女儿长大，却不知如何与青春期女儿的相处；八百…

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威克斯教员带着他刚完成中学学业的学生们修学观光。

克拉拉（麦肯芝·弗依 Mackenzie Foy 饰）的母亲在她很小的时候就离开了她，留给女儿的唯一一样东西是装有无价之宝的盒子。德罗赛尔梅耶（摩根·弗里曼 Morgan Freeman 饰）是克拉拉的教父，在他举办的一场聚会上，一根神秘的金线指引着…

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　　亚茨拉斐尔（麦克·辛 Michael Sheen 饰）是守卫城门的天使，而克劳利（大卫·田纳特 David Tennant 饰）则是堕落的恶魔。两人几千年来都一直隐姓埋名生活在人间，并且通过不断的尝试，在天堂和地狱之间建立了井水不犯河水的互惠互利…